MTD 243-670 User Manual download pdf (Page 26)

1 Einleitung

1.4 Die F

420

-abhängige N

-Methylen-H

MPT-Dehydrogenase (Mtd)

Der reversible Schritt der Reduktion von Methenyl-H

MPT

oder Methenyl-H

zu Methylen-H

MPT bzw. Methylen-H

F wird von vier verschiedenen

Dehydrogenasefamilien katalysiert. Die H

-bildende Methylen-H

MPT-

Dehydrogenase (Hmd) und die F

420

-abhängige Methylen-H

MPT-Dehydrogenase

(Mtd) kommen in methanogenen bzw. in methanogenen und Sulfat reduzierenden

Archaeen vor, die NAD(P)-abhängigen Methylen-H

MPT-Dehydrogenasen (MtdA

und MtdB) werden in methylotrophen Archaeen angetroffen, und die NAD(P)-

abhängigen Methylen-H

F-Dehydrogenasen (z. B. FolD) übernehmen die

entsprechende Reaktion in allen übrigen Organismen (71-74).

Mtd katalysiert den reversiblen Hydrid-Transfer zwischen dem C5-Atom von

reduziertem F

420

) und dem C14-Atom von Methenyl-H

MPT

(siehe

Abbildung 1.6) (72). Die Reaktion ist Re-seitenspezifisch aus Sicht des H

MPT- und

Si-seitenspezifisch aus Sicht des F

420

-Moleküls, d. h. der pro-R Wasserstoff am C14

des Methylen-H

MPT bzw. der pro-S Wasserstoff am C5 des F

420

wird übertragen

(75, 76). Die Stereospezifität der enzymatischen Reaktion steht im Gegensatz zu

derjenigen einer entsprechenden Hydridübertragung in wässriger Lösung, bei der die

pro-S-CH-Bindung am C14 des Methylen-H

MPT reaktiver ist. Dies wird darauf

zurückgeführt, dass sich in letzterem Fall das pro-S-Proton in antiperiplanarer

Position zu den freien Elektronenpaaren der Stickstoffatome im Imidazolidinring

befindet. Es wird also vermutet, dass der Imidazolidinring durch das Protein in eine

Konformation gezwungen wird, in der die pro-R-Bindung reaktiver ist (47).

Da Mtd keine prosthetische Gruppe bindet, verläuft die Reaktion über einen

ternären Komplex bestehend aus Protein, Substrat (Methylen-H

MPT) und

Cosubstrat (F

420

). Bei 1 M (NH

)

beträgt V

max

= 4000 U/mg (k

cat

= 2400 s

-1

), der

apparente K

-Wert für N

-Methyl-H

MPT 80 µM und für F

420

20 µM (77).

1 2 ... 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 ... 143 144

Comments to this Manuals

No comments

MTD 243-670 User Manual Page 26

Comments to this Manuals

Related products and manuals for Unknown MTD 243-670