MTD 243-670 User Manual Page 5

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4.9.14 Elektrotransformation von E. coli ______________________________ 28
4.9.15 Transfektion von M. voltae ___________________________________ 29
4.9.16 Qualitativer und quantitativer Glucuronidase-Reportergentest _______ 29
4.9.17 Herstellung radioaktiver DNA Sonden __________________________ 30
4.9.18 Southern-Blot-Analyse ______________________________________ 30
4.9.19 Präparation von RNA aus M. voltae____________________________ 31
4.9.20 Denaturierende RNA-Agarosegelelektrophorese _________________ 32
4.9.21 Northern-Blot-Analyse ______________________________________ 32
4.9.22 Herstellen einer partiellen Genbank____________________________ 33
4.9.23 Screening einer partiellen Genbank durch Koloniehybridisierung _____ 34
4.9.24 Screening einer genomischen DNA Phagenbank aus M. Voltae______ 34
4.10 C
HROMATOGRAPHISCHE METHODEN ________________________________ 34
4.10.1 Gaschromatographischer Nachweis von CH
4
____________________ 34
5 ERGEBNISSE_____________________________________________36
5.1 IDENTIFIZIERUNG DES GENS SDMA__________________________________ 36
5.2 I
DENTIFIZIERUNG POSITIVER KLONE DURCH DAS SCREENING VERSCHIEDENER
G
ENBANKEN MIT EINER SONDE DES GENS SDMA _______________________ 38
5.3 I
M 3´-BEREICH DES GENS SDMA LIEGEN DIE OFFENEN LESERASTER SDMB UND
SDMC ______________________________________________________ 40
5.4 D
AS GEN SDMA CODIERT FÜR EIN MÖGLICHES CORRINOID-PROTEIN, SDMB UND
SDMC FÜR MÖGLICHE METHYLTRANSFERASEN ________________________ 41
5.5 DAS GEN SDMA WIRD NUR BEI SELENMANGEL TRANSKRIBIERT______________ 45
5.6 B
ESTIMMUNG EINES MÖGLICHEN TRANSKRIPTIONSSTARTPUNKTS DES GENS SDMA47
5.7 D
IE GENE SDMA, SDMB UND SDMC LIEGEN AUF EINEM GEMEINSAMEN
POLYCISTRONISCHEN MESSENGER _________________________________ 49
5.8 M. VOLTAE KANN METHYLIERTE AMINE, DIMETHYLSULFID ODER METHANOL
NICHT FÜR DIE METHANOGENESE ERSCHLIEßEN ________________________ 51
5.9 D
IE KONSTRUKTION VON DELETIONSMUTANTEN DER GENE SDMA, SDMB UND
SDMC ______________________________________________________ 52
5.10 CHARAKTERISIERUNG DER ERHALTENEN M. VOLTAE-KLONE V1
SDMA, V1
SDMB,
V1
SDMC UND V1
SDMBC ______________________________________ 53
5.11 D
IE PROTEINE SDMA UND SDMC SIND AN DER ERSCHLIEßUNG VON SELEN AUS
D
IMETHYLSELENID BETEILIGT______________________________________ 57
5.12 DIE STÄMME V1
SDMA, V1
SDMC UND V1
SDMBC ZEIGEN BEI ANWESENHEIT
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